세포 동결보존액 선택 기준: 세포치료제 제조에서 확인할 항목

동결보존액의 역할과 DMSO 농도

동결보존액은 동결·해동 중 세포 손상을 줄이는 동결보호제(cryoprotectant)를 담은 용액입니다. 가장 널리 쓰이는 동결보호제는 DMSO(dimethyl sulfoxide, 디메틸설폭사이드)이며, 문헌에서 가장 흔한 농도는 10%(v/v)이고 5%까지 낮추려는 흐름이 보고되어 있습니다.[1][2]

DMSO와 주입 반응

DMSO가 든 세포 제품을 주입받은 환자에게서 오한, 오심·구토, 혈압·맥박 변화 같은 위장관·심혈관계 반응이 보고되어 왔습니다.[2][5] 체계적 문헌고찰은 이런 반응이 대부분 가볍고 일시적이며 투여량과 관련된다고 결론지었습니다.[2][3] 조혈모세포 이식에서는 체중 1 kg당 DMSO 1 g이 통상 받아들여지는 상한으로 인용되는데, 문헌에 따라 '1회 주입당' 또는 '1일' 기준으로 적혀 있습니다.[2][4] 해동 후 세척으로 DMSO를 줄일 수 있지만 세포 손실과 손상 위험이 따릅니다.[2][5]

혈청·동물유래 성분

미국 FDA는 동물유래 물질이 외래성 인자(adventitious agent, 의도치 않게 섞여 드는 미생물·바이러스) 유입 위험을 높이고 혈청은 배치 간 편차가 크다고 보아, 가능하면 비동물유래 시약을 고려하도록 권고합니다.[6][7] 국내 고시도 제조과정에 쓰는 물질의 기원·공급원 자료와, 동물유래물질에 외래성 미생물이 없다는 증명을 요구합니다.[8] 무혈청(serum-free) 표기 제품에도 알부민 같은 사람·동물 유래 단백질이 들어 있을 수 있으므로, 이종성분 무함유(xeno-free)나 화학조성 규명(chemically defined) 같은 표기는 조성 자료로 확인합니다.[7][9]

부원료인가, 첨가제인가

제조에 쓰이지만 최종 제품에 남기지 않는 물질은 부원료(ancillary material), 최종 제품의 일부가 되도록 의도된 성분은 첨가제(excipient)로 구분하며, FDA는 DMSO를 첨가제의 예로 듭니다.[6][10] 따라서 동결보존액이 최종 제형에 그대로 남는다면 첨가제 관점의 근거 자료가 필요합니다.[10][11] 관련 기준 문서는 다음과 같습니다.[6][8][12][13][14]

적격성 평가와 규제 지원 자료

FDA는 모든 원료의 등급과 출처를 목록으로 내고, 시험성적서(COA) 등으로 용도 적합성을 입증하는 적격성 평가(qualification) 프로그램을 갖추도록 권고합니다.[6][7] 공급사가 기밀 정보를 FDA에 직접 내 두는 마스터파일(Drug Master File, DMF)이 있으면, 위임장(letter of authorization)을 받아 임상시험계획(IND)에서 교차 참조할 수 있습니다.[6][7]

동결·해동 공정과 평가

체세포 현탁액에는 분당 약 1 °C의 완만한 냉각이 널리 쓰입니다.[1][11] 임상용에는 프로그램식 속도조절 동결기(controlled-rate freezer)가 선호되고, 냉동고에 넣어 쓰는 수동형 냉각 용기는 주로 연구용입니다.[1][15] 해동 후 수 시간에서 수일 사이에 생존 세포가 더 줄 수 있다는 지적이 있습니다.[1] 국내 고시는 세포은행의 해동세포에 대해 확인, 기능시험, 생존세포 회수율, 무균시험 자료를 요구합니다.[8]

용기, 안정성, 공급 변경

• 용기: 치료용은 밀봉되는 용기를 쓰고[1], 제형과의 적합성(흡착·용출)을 검토합니다.[6]
• 안정성: 보관 용기·제형·보관 조건을 명시한 안정성 시험과 동결 유효기간 자료가 필요합니다.[6][8]
• 공급 변경: 공급사나 공정이 바뀌면 품질에 영향을 줄 수 있으므로, 변경을 미리 서면으로 통지받는 체계를 갖춥니다.[7][12]

출처